Se diseñó un método simple y rápido para la determinación de bajas y altas concentraciones de etanol en aire, utilizando una espiral de vidrio para el muestreo y un sistema de inyección por flujo, acoplado a una columna de alcohol oxidasa inmovilizada sobre perlas de vidrio y un sistema de detección por fluorescencia. Se determinó el porcentaje de retención de la alcohol oxidasa sobre las perlas de vidrio por el método de Bradford. Se obtuvo un porcentaje de retención del 97%. Se evaluaron y fijaron la longitud de onda de excitación (310 nm) y de emisión (410 nm), el flujo de la fase móvil (1,05 mL/min), la longitud del reactor (1,00 m), la longitud (7,00 cm) y el diámetro de la columna de alcohol oxidasa (3,0 mm), la concentración de la disolución de hidróxido de sodio (0,15 M), la temperatura de la columna (35 ºC) y se utilizó un lazo de inyección de 0,1mL. Se determinó la linealidad, la repetibilidad, el límite de detección y el límite de cuantificación. El método fue lineal en un ámbito de 1,00 a 5,00 μM de etanol. Se obtuvo un coeficiente de correlación lineal de 0,995, una repetibilidad de 0,8%, un límite de detección y cuantificación de 0,350 y de 0,670 μM, respectivamente.