La especie Lutzomyia shannoni está ampliamente distribuida en el continente americano; es vector confirmado de estomatitis vesicular en bovinos y posible vector de leishmaniasis cutánea en Colombia. El objetivo de este trabajo fue conocer la biología reproductiva y variabilidad genética en loci isoenzimáticos de esta especie. En dos condiciones de laboratorio se analizó y comparó el ciclo biológico, se construyeron tablas de vida horizontales y se estimaron los parámetros poblacionales: tasa neta de reproducción, tiempo generacional, tasa intrínseca de crecimiento natural y valor reproductivo; además, se construyeron tablas de vida verticales y se analizó la mortalidad de una generación en cada microambiente. Se estimó la varianza aditiva y heredabilidad para la fecundidad. Se analizó la variabilidad genética y la distancia genética de cinco poblaciones naturales y una colonia de laboratorio de Lu. shannoni con base en loci que codifican para 11 isoenzimas.