En el Valle de Tulancingo, del Estado de Hidalgo, se realiza una intensa actividad procesadora de lácteos, la cual genera entre 200,000 a 700,000 L de lactosuero, que representa 27,448 mg•L-1 DQO que son vertidos diariamente a embalses, provocando una alta carga de contaminación de los mismos, favoreciendo la formación de focos de infección y a la vez el desperdicio de lactosa, que es el principal componente más importante de este subproducto. Se aplicó un tratamiento de digestión anaerobia, previa adaptación de lodos anaerobios a suministros dosificados de lactosuero en sistema serológico en diferentes tiempos de retención hidráulica (TRH), para la determinación de las condiciones de operación del reactor anaerobio. El desarrollo de la digestión anaerobia se realizó en un reactor piloto anaerobio empacado de flujo ascendente por lote secuenciado en condiciones psicrofílicas por 40 días bajo cargas orgánicas de 4,492.05 mg•L-1 de DQO y donde se obtuvo un buen desempeño del sistema dentro de las 6 h de TRH, produciendo 14.4 mg•L-1•L-1 de biogás con un rendimiento de 0.196 L de biogás por litro de lactosuero tratado con una eficiencia de remoción del 57.8% de DQO.